Chèchè Olandè konbine CRISPR ak bioluminesans nan yon tès eksperimantal poumaladi enfeksyon

Selon chèchè nan Netherlands, yon pwoteyin ki fèk devlope nan lannwit ta ka pi vit ak senplifye dyagnostik maladi viral yo.
Etid yo a, ki te pibliye Mèkredi nan ACS Publications, dekri yon metòd sansib, yon sèl etap pou analize rapidman asid nikleyik viral ak aparans yo lè l sèvi avèk pwoteyin klere klere ble oswa vèt.
Idantifikasyon patojèn pa detekte anprent asid nikleyik yo se yon estrateji kle nan dyagnostik klinik, rechèch byomedikal, ak siveyans sekirite manje ak anviwònman an.Tès reyaksyon chèn polymerase quantitative (PCR) lajman itilize yo trè sansib, men yo mande pou preparasyon echantiyon sofistike oswa entèpretasyon rezilta yo, sa ki fè yo enposib pou kèk anviwònman swen sante oswa anviwònman resous limite.
Gwoup sa a ki soti nan Netherlands se rezilta yon kolaborasyon ant syantis nan inivèsite ak lopital pou devlope yon metòd dyagnostik asid nikleyik rapid, pòtab ak fasil-a-itilize ki ka aplike nan yon varyete de anviwònman.
Yo te enspire pa flash koukouy, klere koukouy, ak ti zetwal fitoplankton akwatik, tout pouvwa pa yon fenomèn ki rele bioluminesans.Efè lumineux-nan-fè nwa sa a ki te koze pa yon reyaksyon chimik ki enplike pwoteyin luciferase la.Syantis yo enkòpore pwoteyin luciferase nan detèktè ki emèt limyè pou fasilite obsèvasyon lè yo jwenn yon sib.Pandan ke sa a fè detèktè sa yo ideyal pou deteksyon pwen-of-care, yo kounye a manke sansiblite segondè ki nesesè pou tès dyagnostik klinik yo.Pandan ke metòd koreksyon jèn CRISPR la ka bay kapasite sa a, li mande anpil etap ak ekipman espesyalize adisyonèl pou detekte siyal fèb la ki ka prezan nan echantiyon konplèks ki fè bwi.
Chèchè yo te jwenn yon fason yo konbine yon pwoteyin ki gen rapò ak CRISPR ak yon siyal bioluminesan ki ka detekte ak yon senp kamera dijital.Pou asire ke te gen ase echantiyon RNA oswa ADN pou analiz, chèchè yo te fè anplifikasyon recombinase polymerase (RPA), yon teknik senp ki opere nan yon tanperati konstan alantou 100 ° F.Yo devlope yon nouvo platfòm ki rele Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS), kote de pwoteyin CRISPR/Cas9 yo espesifik pou diferan pòsyon vwazen nan genòm viral la, yo chak ak yon fragman lisiferaz inik tache ak yo pi wo a.
Lè genomic viral espesifik envestigatè yo ap egzamine prezan, de pwoteyin CRISPR/Cas9 mare nan sekans asid nikleyik sib la;yo vin toupre, sa ki pèmèt pwoteyin luciferase entak fòme ak emèt limyè ble nan prezans yon substra chimik..Pou kont pou substra boule nan pwosesis sa a, chèchè yo te itilize yon reyaksyon kontwòl ki emèt limyè vèt.Yon tib ki chanje koulè soti nan vèt ak ble endike yon rezilta pozitif.
Chèchè yo te teste platfòm yo lè yo devlope tès RPA-LUNAS, ki detekteSARS-CoV-2 RNAsan izolasyon RNA fatigan, ak demontre pèfòmans dyagnostik li yo sou echantiyon prelèvman nasopharyngeal soti nanKOVID 19pasyan yo.RPA-LUNAS te detekte avèk siksè SARS-CoV-2 nan 20 minit nan echantiyon ki gen yon chaj viral RNA osi ba ke 200 kopi/μL.
Chèchè yo kwè ke tès yo ka fasil epi efektivman detekte anpil lòt viris."RPA-LUNAS se atire pou tès maladi enfektye pwen-of-care," yo te ekri.